研究発表を行った学会；第２６回日本分子生物学会年会
２００３年１２月１０日〜１３日（神戸）
タイトル；Homeobox蛋白およびhelix-loop-helix型転写因子のクロス
　　　　　トークによる中枢神経系の細胞系譜制御メカニズムの解析
発表者；植村　篤実　氏
　　　（熊本大学　発生医学研究センター　転写制御分野）
Abstract；
　中枢神経系の発生過程における様々な転写因子の発現とその役割については、homeobox蛋白及びhelix-loop-helix(HLH)型因子を含めて近年その詳細が明らかになりつつあるが、全容は未だ解明されていない。神経発生過程においては未知のクロストークメカニズムが複雑かつ厳密に制御している可能性が高い。今回、homeobox蛋白とHLH型転写因子の物理的会合を介したクロストークの存在を示唆する結果を得たので報告する。
　Basic HLH (bHLH)型転写因子群は神経系の細胞系譜制御に関わっており、その活性は抑制型HLH因子Id群によって阻害される。今回、我々はId1が結合して活性抑制を受ける因子の探索を通じて神経系の細胞系譜制御を明らかにすることを目的に、Id1をbaitとしたhuman fetal brain cDNA library のyeast two-hybrid screeningを行なった。その結果bHLH型因子の他に、意外にもhomeobox蛋白であるNkx6.2(Gtx)とId1が結合することがわかった。また、 Nkx6.2はId1以外に近縁のId4、さらにはproneural bHLH型転写因子Mash1, Ngn1とも結合することが判明した。強制発現系によりNkx6.2とMash1, Ngn1とのクロストークを解析したところ、 E12/Mash1, E12/Ngn1によるE-box含有promoterの活性化がNkx6.2により抑制されるという結果を得た。当初、Nkx6.2はオリゴデンドロサイトに発現している因子として発見されたが、今回の結果からはNkx6.2がMash1, Ngn1と結合してニューロン分化を抑制している可能性が推察される。
　これらの結果はhomeobox蛋白とHLH型転写因子の物理的会合を示しており、中枢神経系の各種の細胞分化過程における種々の転写因子の機能的相互作用を解明する上で大変興味深い。
　現在、神経幹細胞へのNkx6.2遺伝子導入による細胞系譜の変化をもとに、これらの転写因子群のクロストークによる中枢神経系の細胞系譜制御を解析中である。