研究発表を行った学会；第２７回日本分子生物学会年会
２００４年１２月　８日〜１２月１１日（神戸）
タイトル；海馬領域神経前駆細胞に対するWnt3aの作用
発表者；吉永　豊　氏
　　　（熊本大学　発生医学研究センター　転写制御分野）
Abstract；
　中枢神経系の発生過程におけるWnt canonical経路の活性化は、神経前駆細胞の増殖を促進する事が知られているが、これに相反してニューロン分化を誘導するという報告もあり、未だ不明な点が残されている。canonical経路を活性化するWnt3aは、発生過程の大脳の海馬采から分泌されている。Wnt3aのknockout mouseでは海馬神経細胞が消失することが報告されたため、同分子の海馬神経の発生における役割が示唆されているものの、その作用点や分子基盤は未解明な点が多い。そこで本研究ではWnt3aが培養海馬神経前駆細胞の増殖や分化に与える影響を解析した。
　胎生15日目マウスより海馬領域を摘出して細胞を調整し、recombinant mouse Wnt3a添加群とコントロール群の２群に分けて4日間培養したところ、Wnt3a添加群の全細胞数に有意な増加が検出され、これに比例して、Tuj1陽性ニューロンの数も増加していた。すなわち、Wnt添加により神経前駆細胞の増殖が促進され、前駆細胞より分化したニューロンの数も二次的な影響で増えたことが予想された。ところが、培養開始１日後にBrdUを取り込ませ、さらに３日間培養を行って抗BrdUおよびTuj1抗体で２重染色をしたところ、培養１日目に増殖していたBrdU陽性細胞はTuj１陽性ニューロンに分化していないことがわかった。以上、２つの予備的実験の結果から、胎生マウス海馬領域には、Wnt3aシグナリングによって細胞増殖が誘導される細胞群(全細胞数およびBrdU陽性細胞の増加)と、神経分化が誘導される細胞群(BrdU-/Tuj1+細胞の増加)の2種類が混在することが示唆された。これらの結果を基に今後の実験を進めていく予定である。