201912,Tanaka

研究発表を行った学会；オリジナルデータ
タイトル； dsRNAのエンドサイトーシスを介したRNAi誘導機構の解明.
発表者；田中　翼氏
（熊本大学　発生医学研究所　生殖発生分野）
要旨；
RNA干渉（RNAi）は二本鎖RNA（dsRNA）によって配列特異的に遺伝子発現が抑制される現象である。RNAiは、ウイルスに対する生体防御機構として機能していると考えられ、抗ウイルス治療や核酸医薬（RNAi医薬）開発への応用も期待されている。dsRNAのエンドサイトーシスを介したRNAiの誘導経路において、エンドサイトーシスされたdsRNAは、小胞輸送を経て細胞質に移行し、標的mRNAの発現を抑制する。これまでに細胞質でのRNAi誘導制御のメカニズムについては詳細な解析が進められているが、dsRNAがエンドサイトーシスされてから細胞質に至るまでの過程、特にdsRNAの細胞質移行の制御機構についての知見は極めて乏しい。
私たちは、リソソームに局在するH+/Cl-交換輸送体Clc-b/Ostm1がdsRNAのエンドサイトーシスを介したRNAi誘導に必要であることを見い出した。Clc-b/ostm1を欠失したショウジョウバエ変異体、および培養細胞（S2細胞）では、dsRNAのエンドサイトーシスを介したRNAiの誘導効率の顕著な低下が認められた。一方、Clc-b/ostm1変異体において、核内でのdsRNAの発現によるRNAi誘導経路、すなわちエンドサイトーシスを介さないRNAi誘導経路は、正常に機能していた。また、Clc-b/Ostm1の機能欠損は、dsRNAの取り込みやリソソームへの小胞輸送には影響を示さなかった。以上の結果から、H+/Cl-交換輸送体 Clc-b/Ostm1は、『dsRNAの小胞から細胞質への移行』に関与すると予想された。